最近做实验,碰到一些问题纤维素酶活性1:1000是什么意思?如何用纤维素酶?使用条件什么的如何使用活性1:1000的纤维素酶,并不是如何配置缓冲溶液和测试活性,还有详尽一些的回答么?谢
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/30 00:24:06
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纤维素酶是水解纤维素生产葡萄糖及纤维二糖的一类酶的总称.包括C1酶、CX酶及纤维二糖酶.C1酶使天然纤维素晶体分链,成为直链纤维素.CX酶不能水解天然纤维素,但能分解直链纤维素β-1,4糖苷键生成纤维二糖.纤维二糖经过纤维二糖酶作用生成葡萄糖.以羧甲基纤维素钠盐(简称CMC)作为纤维素酶作用的底物.但需要指出的是CMC无论在结构上还是在性质上都不同于天然纤维素,天然纤维素不溶于水,而CMC有很强的亲水性,非常容易被纤维素酶分解.在相同条件下,同一种纤维素酶分解CMC所产生的还原糖远大于水解天然纤维素所产生的还原糖.
操作方法
pH值为4.6的柠檬酸缓冲浓浓度为0.1mol/l的柠檬酸溶液26.7ml和浓度为0.2mol/l的磷酸氢二钠溶液23.3ml,混合后加水稀释到1000ml.
pH值为5.0的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液取浓度为0.2mol/l的磷酸氢二纳溶液25.7ml和浓度为0.1mol/l柠檬酸溶液24.3m1,混合后加水稀释至 1000ml.
羧甲基纤维素钠盐溶液称取CMC 1g,加水1000ml,在水浴中加热溶解,再加入20mlpH值为5.0的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液和 40ml水,混匀.
样品酶活的测定取纤维素酶粉5g,充分碾细,加100ml蒸馏水,与40℃水浴中,搅拌3Omin,使酶蛋白充分溶出,过滤,离心取上清液,稀释至恰当倍数.吸取稀释的酶液lml,加入 CMC溶液4ml,混匀,在40℃保温糖化30min,
请问你是要用纤维素处理细胞壁吗